孔雀石绿胶体金快速检测卡（试剂盒）使用说明书

本产品用于快速检测水产（鱼、虾）组织中的孔雀石绿，整个检测过程大约需要30-60分钟，适用于各类企业及检测机构。检测组织样本检测限为2μg/kg。

1、检测原理

孔雀石绿快速检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理，样本中的孔雀石绿在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和NC膜检测线上孔雀石绿－BSA偶联物的结合。如果样本中孔雀石绿含量大于检测限，检测线T比质控线C浅或者T线不显色，结果为阳性。反之，检测线T显色与质控线C线相当或者比C线深，结果为阴性。

2、产品组成

3、样本收集及处理

鱼、虾等水产收集于干净的容器或自封袋中；若不能及时送检，样本应该去除脂肪，用剪刀剪碎或者用绞肉机搅碎后，分装保存于-20℃下，忌反复冻融。

3.1样品处理 (组织)

⑴ 取一定量的水产样本（鱼、虾等）去除脂肪后，用剪刀剪碎或者用绞肉机搅碎；

⑵ 称取3 g已处理待测样本于50 mL离心管中，加入3 mL提取剂1，再加入8mL乙**和3 mL 提取剂 2，震荡混匀5分钟，4000转离心5分钟；

⑶ 取步骤(2)中上层待测液体4 mL于5 mL离心管中，加入100μL氧化剂，颠倒混匀10秒，于60 ℃下，利用氮气或空气将溶剂吹干（吹干后残留约1滴液体若吹不干为正常现象，可直接复溶使用，不影响检测结果）。

⑷ 向吹干的离心管中用移液器准确加入0.3mL MG复溶液和500 μL正己烷，于室温下4000转离心1分钟（如果分层不明显可延长离心时间至5分钟）或静置至明显分层，取下层液体（150μL）用于检测。（移液器吸头一定要抵到离心管最底部取底层溶液，以免取到油脂，导致结果异常）

注：样本提取完后，请在10分钟内进行检测。

4、检测步骤

⑴ 测试前将未开封的检测卡及待检样品溶液恢复至室温。

⑵ 从原包装铝箔袋中取出检测卡和金标微孔，在半小时内使用。

⑶ 用移液器吸取待检样品溶液150 μL于金标微孔中，等待反应2分钟，反复吹打至孔内红色物质完全溶解；

⑷ 将检测卡平放，吸取孔内所有溶液滴加到加样孔中，加样后开始计时；

加样示意图：

5、结果判定：反应5～8分钟根据示意图判断结果，其它时间判读无效；

阴性结果： T线比C线深，或一样深，表示样本中孔雀石绿浓度低于其检测限2ppb或不含待检药物；

阳性结果：T线比C线浅，表示样本中孔雀石绿浓度高于其检测限2ppb；

无效反应: 如果测试结果C线未出现，表示此试剂已失效。

6、储存及有效期：

Ø 原包装在4-30℃阴凉避光干燥处储存，切勿冷冻。

Ø 有效期为12个月，生产日期及有效期见包装盒。

7、注意事项：

² 检测卡在室温下一次性使用，请勿重复使用。

² 操作时请勿触摸试纸显示区，检测时避免阳光直射及风扇直吹。

² 本方法为筛查方法，若出现阳性结果，建议用确证方法复查。

² 试验中务必戴上一次性防护手套。

² 试验场地要求常温20~30℃的通风条件下进行。