水质大肠菌群快速检测纸片
包装规格:1份/水样/包(15张纸片) 15管法
1、适用范围 水质肠菌群的测定 (对应发酵管15管法 )
本产品适用于地表水(湖水、水源水)、生活饮用水、地下水及经处理后的废水等清洁水样中大肠菌群的快速检验与筛查。
本方法的检出限为20MPN/L。
2、标准和定义
执行标准:生活饮用水卫生标准(GB 5749);生活饮用水标准检验方法(GB/T 5750.12)。
在37℃培养,24h内能发酵乳糖酸产气的需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
3、方法原理及特点:
将乳糖胆盐选择性培养基和TTC显色剂加载在纸片上,经培养后能够在纸片上生长并发酵乳糖产酸的即为大肠菌群阳性,记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数,根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数。
与国标法中的十五管法相对应,将原来传统几步的试验简化成一步法,时间由78 h缩短为18h以内,省去了制备培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作,随时可以打开包装进行抽样检测。
4、操作方法
4.1 接种:用灭菌吸管吸取10mL待测水样原液插入装有大纸片的塑料薄膜袋中,均匀涂布,共做5个重复;分别取1mL待测水样原液加到小纸片中,共接5个重复;另取1mL水样加到9mL灭菌生理盐水中混匀,用1mL灭菌吸管分别吸取1mL(即0.1mL水样),加到最后5片小纸片中。
4.2 培养:将接种好的纸片放于培养箱中,36℃±1℃培养15~18h。
5、结果判读
观察每片颜色变化,若纸片变黄或在黄色背景上呈现红色斑点为大肠菌群阳性,若纸片保持紫蓝色不变或在紫蓝色背景上呈现红色斑点,但周围没有黄色均为大肠菌群阴性。
6、结果报告
根据阳性反应纸片数,查MPN表可得出水样中大肠菌群的MPN值。如水样污染严重含菌量较多,可将水样稀释成10-1和10-2再加到纸片上,即实际水样加量为1mL、0.1mL、0.01mL水样,其实际MPN值乘以10,以此类推(或采用LCHJ755B 水质总大肠菌粪大肠菌群快速测定纸片)。
*MPN检索表 参考国标乳糖发酵管法一致或向客服索取。
6.1、列举说明
假设检验15张纸片阳性数分别为5-1-0,那么查水质大肠菌群MPN检索表可知,大肠菌群的MPN值为每100mL水样中33,如果接种量为1mL、0.1mL、0.01mL时,MPN值为330。
7、保存条件
本产品需存放在4℃~10℃冰箱中,保质期为一年,铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,一个月内用完。在高湿度的环境中可能出现冷凝水,最好在拆封前将整包回温至室温。
8、开展微生物试验的相关仪器及设备(自备)
8.1恒温培养箱:37℃±1℃。
8.2高压蒸汽灭菌器:121℃、101.3kpa。
8.3冰箱:0-4℃
8.4移液管(或可调移液器):1±0.01ml、10±0.1ml。
8.5 试管:φ15mm×150mm.
8.6采样瓶:500ml。
注1:移液器、试管、采样瓶等玻璃器皿实验前要按无菌操作要求包扎,121℃高压蒸汽灭菌20min,烘干,备用。
9、注意事项:
9.1 应避光低温(10℃以下)保存,并注意防潮,如发现纸片变为粉红色即为失效。
9.2 可疑结果的判断
大肠菌群菌量的多少与结果的显示密切相关,可出现3种不同现象:(1) 菌量较大(≥103cfu/mL),整个纸片变黄而又无红色斑点(或红晕);(2) 菌量适中(102~103 cfu/mL),整个纸片也变黄,但有小而密集的红色斑点;(3) 菌量较少(≤102 cfu/mL),纸片可呈紫蓝色,并有散在或较密集的红色斑点,其周围变黄。因此菌量较大时,可能出现可疑现象。此时应通过加大样品稀释度或进一步做复发酵进行证实。其它可疑现象也可通过复发酵实验进行确认。
9.3 确认试验的方法
进行确认试验,用灭菌摄子无菌操作将可疑纸片移种到乳糖发酵管里,置37 ℃ 24小时培养后,对其产酸产气者判为大肠菌群阳性,否则判为阴性。
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